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以一个个经典案例为载体，从法医的视角讲述案件侦破的过程，将刑事科学技术与刑侦紧密结合。例如死亡时间的概念，《法医密档》中就会对死亡时间做详细的介绍。法医是通过什么方式，能够精准的推算出死者的死亡时间，进而为刑侦人员提供可靠的破案依据。除了“死亡时间”之外，还有如何确定“死者身份”、如何通过一滴干枯的血迹寻找凶手等等。节目在破解案件的同时，也在传递法医“为死者代言，为生者谋权”的职业精神。。圣约翰大学实验室女教授于胜男（李若斯饰）和科学家康华生（徐亮饰）结伴来至梧县，调查总探长洪涛的老友——狱警老苏州苏义——公报私仇杀害某黑帮头目的案子。案情扑朔迷离，老苏州也供认不讳，但胜男、华生二人通过缜密的调查还是发现该案的蹊跷之处。他们合力拆穿了作为目击证人刘小三的虚假证词，而刘小三为避免被周彪的狱中同伙杀害，恳求胜男二人帮他转到上海监狱，为此他愿意将“铁镜公主”的线索作为交换条件。铁镜公主数年前是名震上海滩的女杀手，她手段残忍，形迹诡异，始终不曾被警方抓住任何把柄。 在梧县狱警小吴的配合下，胜男等人踏上押解刘小三的旅程。谁知更大的危险等在前方……。